Ученые из ФНКЦ ФХМ им. Ю. М. Лопухина ФМБА России и МФТИ разработали новую методику анализа, которая будет полезна для изучения антикоагулянтов. Необходимые для анализов реактивы и оборудование — отечественного производства, что делает методику импортонезависимой и экономически доступной.
Результаты исследований опубликованы в журнале ФМБА России «Медицина экстремальных ситуаций».
Болезни, связанные с образованием тромбов, являются серьезным вызовом для здравоохранения. Несмотря на то, что в арсенале врачей имеется довольно широкий набор веществ, подавляющих свертывание крови, изучение и поиск новых антикоагулянтов продолжается во всем мире. Поиск новых антикоагулянтов требует простых и недорогих методов первичного определения их активности для отбора перспективных претендентов и отсева остальных.
В клинической диагностике используют простые, дешевые и хорошо освоенные тесты на свертываемость крови — активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ), протромбиновое время (ПВ) и тромбиновое время (ТВ). Они предназначены для определения эффективности гемостаза в плазме крови пациентов. АЧТВ позволяет оценить работу внутреннего пути активации коагуляции, с помощью измерения ПВ определяют коагуляцию при активации внешнего пути, а ТВ показывает эффективность активации тромбином фибриногена и полимеризации фибрина. В то же время, эти тесты можно использовать и для другой цели — для поиска новых веществ-антикоагулянтов и исследования влияния этих веществ на процесс свертывания крови.
«Мы разработали методику биохимического анализа веществ, проявляющих антикоагуляционные свойства, которая основана на клинических тестах, широко применяемых для оценки свёртываемости крови у пациентов. Все необходимые для анализов реактивы и оборудование — отечественного производства», — рассказал ведущий научный сотрудник лаборатории генной инженерии ФНКЦ ФХМ им. Лопухина ФМБА России, доцент кафедры молекулярной и трансляционной медицины МФТИ Валентин Манувера.
Работоспособность модифицированных тестов была испытана на трех веществах-антикоагулянтах. Первый из них — цистеин-богатый антикоагулянт медицинской пиявки, представляет собой недавно обнаруженный в лаборатории генной инженерии ФНКЦ ФХМ им. Лопухина ФМБА России белок-антикоагулянт, который обладает высоким потенциалом по подавлению свертывания крови. Вторым из объектов исследования является рекомбинантный белок гирудин, наиболее известный антикоагулянт медицинской пиявки. Третий использованный антикоагулянт — это гепарин, олигосахарид, очень широко используемый в клинической практике. На примере этих трех веществ показано, что эти методики могут быть полезны при поиске новых антикоагулянтов и исследовании влияния разных веществ на процесс свертывания крови. Все использованные реактивы и оборудование отечественного производства, широко распространены и имеют невысокую стоимость.
«Разработанная методика позволяет обнаружить вещества-антикоагулянты в самых разных смесях, а также провести первичный анализ их влияния на свёртывание крови», — добавляет Валентин Манувера. Ученые ожидают, что экономически доступные и импортонезависимые методики поиска и первичного анализа антикоагулянтов будут способствовать развитию фармацевтической отрасли России.
Исследование выполнено за счет гранта РНФ № 23-25-00006.